Uvod

U modernim biomedicinskim i hemijskim laboratorijama,Epruvete za jednokratnu upotrebu se široko koriste u kulturi ćelija, hemijskim reakcijama, konzerviranju uzoraka i drugim kritičnim operacijama.Njihov značaj u eksperimentalnom procesu se ne može zanemariti. Budući da su ove epruvete za kulturu u direktnom kontaktu s eksperimentalnim uzorcima, njihov materijal, veličina, zatvaranje, pa čak i to da li su sterilizirane ili ne, imat će značajan utjecaj na eksperimentalne rezultate. Nepravilan odabir može dovesti do unakrsne kontaminacije, gubitka uzorka ili pristranosti eksperimentalnih podataka, što utječe na tačnost i ponovljivost studije.

Glavne vrste epruveta za jednokratnu upotrebu

Postoji širok asortiman epruveta za jednokratnu upotrebu, a istraživači trebaju odabrati pravu vrstu u skladu sa svrhom eksperimenta, radnim okruženjem i karakteristikama uzoraka. Kategorizirane su u sljedeća tri aspekta: materijal, kapacitet i posebna funkcija:

1. Klasifikacija po materijalu

Epruvete za jednokratnu upotrebu izrađene od različitih materijala razlikuju se po otpornosti na temperaturu, hemijskoj stabilnosti i optičkim svojstvima:

• Polipropilene: Dobra otpornost na visoke temperature i hemijsku koroziju, pogodno za rutinsku kulturu ćelija, eksperimente molekularne biologije i druge primjene.
• PolistirenVisoka transparentnost, lako se posmatra stanje tečnosti i ćelija, često se koristi u optičkim ispitivanjima, ali nije otporan na visoke temperature, obično se ne može koristiti za autoklaviranje.
• Staklene epruvete za kulturuIako se mogu ponovo koristiti i hemijski su stabilni, skupi su, zahtijevaju dodatne postupke čišćenja i sterilizacije te predstavljaju potencijalni rizik od unakrsne kontaminacije.

2. Klasifikacija po kapacitetu

U zavisnosti od količine uzorka potrebne za eksperiment, kapacitet epruveta za kulturu kreće se od mikro do velikih količina:

• Mikrocentrifugalne epruvete: obično se koristi za doziranje uzoraka, centrifugalnu precipitaciju, ekstrakciju DNK/RNK i druge operacije.
• Standardne epruvete za kulturuNajčešće korišteni kapacitet u laboratoriji, pogodan za kulturu ćelija, reakcije miješanja, konzerviranje uzoraka i druge svrhe.
• Epruvete za kulturu velikog kapacitetaPogodno za kulture ćelija velikih razmjera ili obradu velikih količina rastvora.

3. Klasifikacija po posebnoj funkciji

Cijevi su dostupne s raznim dodatnim karakteristikama kako bi se zadovoljile specifične eksperimentalne potrebe:

• Aseptične prethodno sterilizirane epruveteFabrički sterilizirano gama zračenjem ili autoklaviranjem, pogodno za eksperimente sa visokim aseptičnim zahtjevima.
• Sa poklopcem patroneOmogućava izmjenu plinova, pogodno za mikroorganizme ili ćelijske linije kojima je potrebna aeracija i sprječava kontaminaciju iz egzogenih izvora.
• Cijevi otporne na niske temperatureMože se sigurno koristiti u okruženju sa -80℃ ili čak tečnim azotom, pogodno za dugotrajno očuvanje bioloških uzoraka na niskim temperaturama.
• Graduirane/negraduirane cijeviGraduirane epruvete su pogodne za brzu procjenu i doziranje volumena tekućine kako bi se povećala efikasnost eksperimenata.

Ključni faktori pri odabiru epruveta za kulturu

U procesu dizajna i izvođenja eksperimenta, odabir odgovarajućih epruveta za jednokratnu upotrebu ključan je za osiguranje eksperimentalne efikasnosti i tačnosti rezultata. Istraživači bi trebali sveobuhvatno razmotriti nekoliko ključnih faktora:

1. Vrsta eksperimenta

Zahtjevi za epruvete za kulturu značajno se razlikuju od eksperimenta do eksperimenta i treba ih odabrati prema sadržaju operacije i eksperimentalnom okruženju:

• Za kulturu ćelijaZahtjevi za sterilnost su izuzetno visoki i preporučuje se upotreba sterilnih, prethodno steriliziranih epruveta sa prozračnim čepovima za uloške kako bi se osigurala izmjena plinova.
• PCR / molekularno-biološki eksperimenti: ne smiju sadržavati DNK enzime, RNK enzime i apirogene cijevi, često koristite cijevi od polipropilena čistog kvaliteta.
• Skladištenje na niskim temperaturamaTreba koristiti epruvete s dobrom otpornošću na niske temperature kako bi se izbjegla liza na niskim temperaturama.

2. Karakteristike uzorka

Fizičko-hemijska svojstva uzorka direktno utiču na izbor materijala i funkcionalnu konfiguraciju epruveta za kulturu:

• Tečni ili čvrsti uzorci: određuje potrebnu zapreminu i oblik otvora cijevi.
• Kiseli ili alkalni uzorciVisoko korozivni uzorci zahtijevaju hemijski otporne materijale kako bi se izbjegla deformacija ili kontaminacija cijevi.
• Treba li izbjegavati svjetlostZa uzorke osjetljive na svjetlost treba odabrati ćilibarnu ili neprozirnu epruvetu za materijalnu kulturu kako bi se spriječila fotodegradacija.

3. Zahtjevi za sterilizaciju

Potreba za sterilizacijom i vrsta sterilizacije koja se koristi su ključni faktori pri odabiru cijevi:

• Predsterilizacija u odnosu na samosterilizacijuFabrički prethodno sterilizirani proizvodi su pogodni za eksperimente visokog protoka, štedeći vrijeme; ako laboratorija ima opremu za sterilizaciju u autoklavu, možete odabrati PP cijevi koje se mogu autoklavirati.
• Kompatibilnost sa sterilizacijomNa primjer, PS materijal nije pogodan za autoklaviranje i namijenjen je samo za jednokratnu upotrebu.

4. Kompatibilnost

Epruvete trebaju biti dobro prilagođene laboratorijskoj opremi kako bi se osigurao nesmetan rad i pouzdani rezultati:

• Centrifugalna kompatibilnostCijevi koje se koriste za centrifugiranje moraju biti strukturno čvrste kako bi izdržale centrifugalne sile pri visokim brzinama rotacije.
• Kompatibilnost automatizacijeZa eksperimente koji zahtijevaju upotrebu robota za pipetiranje, automatiziranih sistema za doziranje itd., moraju se koristiti standardizirane veličine epruveta.

5. Troškovi i održivost

Razumna kontrola troškova i potrošnje resursa također je važno razmatranje u ispunjavanju eksperimentalnih potreba:

• Jednokratna u odnosu na višekratnu upotrebu: epruvete za jednokratnu upotrebu jednostavne su za rukovanje i izbjegavaju kontaminaciju, pogodne su za eksperimente visokog protoka; staklene epruvete za višekratnu upotrebu pogodne su za osnovne eksperimente s ograničenim budžetom.
• Razmjera kupovineKupovina velikih količina može smanjiti cijenu po jedinici, pogodno za dugoročne projekte velikih razmjera; male, prilagođene specifikacije su fleksibilnije, ali relativno skuplje.

Preporuke za uobičajene scenarije primjene

U skladu sa specifičnim potrebama različitih vrsta eksperimenata, sljedeće epruvete za jednokratnu upotrebu preporučuju se za nekoliko uobičajenih scenarija primjene, s ciljem poboljšanja efikasnosti i pouzdanosti eksperimenata:

1. Kultivacija ćelija

• Preporučeni tipsterilne polipropilenske epruvete za kultivaciju s prozračnim čepovima za uloške
• RazlogPolipropilenski materijal ima dobru hemijsku inertnost i biokompatibilnost, pogodan za tekućinu za ćelijsku kulturu. Poklopac kertridža može ostvariti efikasnu izmjenu plinova, spriječiti mikrobnu kontaminaciju i zadovoljiti plinsko okruženje potrebno za proliferaciju ćelija.

2. Molekularna realizacija PCR/qPCR

• Preporučene vrste: specijalizirane PCR epruvete bez nukleaza i pirogena ili mikrocentrifugalne epruvete
• RazlogPolipropilenske epruvete visoke čistoće, nakon stroge obrade, mogu efikasno spriječiti degradaciju ili kontaminaciju uzorka, kako bi se osigurali tačni i pouzdani rezultati amplifikacije. Preporučuje se dizajn s tankim zidom radi poboljšanja efikasnosti prijenosa topline.

3. Skladištenje na niskim temperaturama

• Preporučeni tipPolipropilenska cijev otporna na niske temperature s dizajnom otpornim na pucanje uslijed smrzavanja i navojnim zatvaračem
• RazlogOve epruvete se mogu koristiti za dugotrajno skladištenje uzoraka na -80°C ili čak u tekućem dušiku, a posebna struktura sprječava pucanje i curenje uzorka u epruveti. Pogodne su za dugotrajno skladištenje ćelijskih linija, uzoraka krvi, proteina ili nukleinskih kiselina.

4. Centrifuga

• Preporučene vrstepolipropilenske cijevi visoke tolerancije, okruglog ili konusnog dna, s centrifugalnim rotorima
• RazlogPP cijevi imaju dobru centrifugalnu otpornost i mogu izdržati visoke centrifugalne sile bez deformacije ili pucanja. Konusno dno pomaže u centralnom sakupljanju ćelija ili taloga i povećava brzinu oporavka.

Uobičajene greške i načini da ih izbjegnete

U praksi, eksperimentalni neuspjesi zbog nepravilnog odabira epruveta za kulturu se povremeno događaju. U nastavku je navedeno nekoliko uobičajenih grešaka i odgovarajućih prijedloga za rješenja, kao referenca za istraživače:

1. Zloupotreba materijala za autoklaviranje koji nisu otporni na visoke temperature